天正信達向您介紹ELISA試劑操作加樣與洗板
一、ELISA加樣操作要點
基礎規范?:加樣前將試劑、樣本平衡至室溫,使用校準后的低吸附槍頭,每加完一個樣本更換槍頭,避免交叉污染。
操作細節?:垂直懸空加樣,槍頭不接觸孔壁,對準孔底緩慢注入液體,避免產生氣泡;若出現氣泡,輕彈板底消除,防止干擾后續讀數。
排布要求?:標準品從高濃度到低濃度依次加樣,所有標準品、樣本設置雙孔,同時預留空白孔、陽性/陰性對照孔,保障數據可靠性。
二、ELISA洗板操作要點
前期準備?:提前按說明書稀釋濃縮洗滌液,若冷藏后析出結晶,37℃水浴溶解后再配制,使用新鮮去離子水,現配現用。
手工洗板?:棄去孔內反應液后,每孔加滿300-350μL洗滌液,靜置浸泡30-60秒后甩干,在無塵吸水紙上拍凈殘留液體,按要求重復3-5次,全程避免孔內長時間干涸。
自動洗板?:提前沖洗管路,設置每孔注液250-300μL、浸泡30秒,調整針頭高度避免刮傷孔底,程序結束后輕拍酶標板去除殘留液。
三、注意事項
加樣后及時貼緊封板膜,減少液體蒸發引發的邊緣效應,保證孵育溫度穩定。
洗板次數嚴格遵循說明書,次數不足會導致背景偏高,次數過多易洗脫有效結合物,降低檢測信號。
最后一次洗板后需拍干,避免殘留洗滌液稀釋后續試劑,造成顯色偏淺、結果偏差。
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