酶聯免疫吸附試驗（ELISA）試劑盒使用原理

    酶聯免疫吸附試驗ELISA試劑盒使用原理

    ELISA試劑盒的原理是?抗原與抗體的特異性結合+酶催化顯色放大?，通過顏色深淺定量檢測目標物的含量。

    基礎流程

    先將已知抗原/抗體固定在微孔板等固相載體表面，加入待測樣本后，樣本中的對應抗體/抗原會與固相載體上的物質發生特異性結合，再加入酶標記的抗體，形成免疫復合物。

    信號放大與定量

    酶標記物中的酶可催化底物發生顯色反應，比如TMB底物會從無色變為藍色，加終止液后轉為穩定黃色，顏色深淺與目標物濃度正相關，通過酶標儀讀取450nm波長下的吸光度值，結合標準曲線就能算出待測物的準確含量。

    不同檢測模式適配場景

    雙抗體夾心法：用兩個抗體“夾住"大分子抗原，適合檢測蛋白質、抗原等，靈敏度和特異性高。

    競爭法：適配激素、藥物等小分子物質，樣本中目標物越多，最終顯色越淺。

    間接法：多用于抗體檢測，比如疫苗效價測定，通過酶標二抗放大信號。

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