ELISA實驗:血清樣本操作參考
ELISA實驗血清樣本全流程操作參考,覆蓋采集、處理、保存全環節關鍵參數:
操作環節 具體參數要求
血液采集 采血管:無抗凝劑、無熱原/內毒素試管;推薦采血量:3~5mL
凝固處理 室溫靜置30min~2h自然凝固,或4℃冰箱過夜靜置
離心分離 離心條件:4℃,1000×g 離心15~20min(或3000轉/分 離心10min)
樣本用量 常規檢測單孔需50~100μl血清,做復孔需預留2倍以上體積
短期保存 2~8℃密封存放,最長可保存7天
長期凍存 分裝為100~200μl/管,-20℃可保存1個月,-80℃可保存6個月以上
樣本復融 取出后置于室溫環境緩慢均衡至融化,輕柔顛倒混勻
異常樣本處理 出現沉淀/絮狀物:4℃ 1000×g再次離心10min,取上清檢測;輕度高脂樣本可按1:4比例用生理鹽水稀釋后檢測
注意事項:
全程避免劇烈搖晃,防止機械性溶血
禁止高溫加熱促凝,避免蛋白變性失活
小心吸取上層淡黃色清亮血清,嚴禁觸碰下層血細胞層
提前預估檢測指標數量,預留充足樣本量備用
僅適用于3天內可完成檢測的無菌分離樣本,有菌樣本禁止2~8℃長期存放
嚴格避免反復凍融,凍存管標注清晰樣本編號、采集日期
禁止水浴加熱快速融解,禁止劇烈渦旋振蕩
重度溶血、嚴重脂血、細菌污染樣本直接棄用,避免造成假陽性/假陰性結果
注:以上科研產品資料供參考,具體可咨詢技術老師!
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